一、技术名称

亚硫酸盐多重扩增子测序（BSMAS）（候选位点DNA甲基化检测）

二、应用领域

1. 临床医学：癌症早筛（如ctDNA甲基化标志物检测）、预后监测及用药指导。

2. 基础科研：表观遗传机制研究（如环境暴露、发育调控中的甲基化动态）。

3. 农业与生态学：作物抗逆基因筛选、环境胁迫对生物表观遗传的影响分析。

三、技术简介

BSMAS是一种靶向DNA甲基化检测技术，通过整合多重PCR、亚硫酸氢盐（Bisulfite）转化和二代测序（NGS）实现高效率检测。其核心流程包括：①亚硫酸盐处理DNA，将未甲基化的胞嘧啶（C）转化为尿嘧啶（U），保留甲基化C；②设计多重引物一次性扩增多个靶向片段，覆盖1-100个目标区域；③两轮PCR直接构建测序文库，无需传统建库步骤。该技术仅需100ng DNA或微量组织细胞，通过2000×测序深度精准检测单碱基甲基化水平，尤其适用于低频甲基化事件（如肿瘤早期ctDNA）。其成本低（约100元/样本/片段）、周期短（6周完成实验与分析），在临床和科研中兼具灵活性与经济性。

四、技术优势

1. 低成本高效：单样本/片段成本仅远低于亚硫酸盐克隆测序，且实验周期短、工作强度低。

2. 低样本需求：支持少量DNA（少于100ng）或珍贵样本（FFPE、液体活检），减少样本损耗。

3. 高灵敏度：2000×测序深度可检测低至1%的甲基化水平，适于早期癌症或环境暴露研究。

4. 靶向精准：灵活覆盖1-100个目标区域，避免全基因组冗余数据，分析更聚焦。

5. 简易流程：两轮PCR完成文库构建，无需复杂建库，适合中小规模项目快速推进。

五、相关图片

技术流程图：

六、典型案例

已发表多篇高水平论文，包括：

1. Zhenzhen Xie, Songlin Sun, Honglei Ji, Maohua Miao, Wanhong He, Xiuxia Song, Wencheng Cao, Qihan Wu*, Hong Liang *, Wei Yuan. Prenatal Exposure to Per- and Polyfluoroalkyl Substances and DNA Methylation in the Placenta_A Prospective Cohort Study. J Hazard Mater. 2024, Feb 5:463:132845. （IF=13.6，中科院分区1区）

2. Yafei Chen, Baoqin Huang, Hong Liang, Honglei Ji,Ziliang Wang, Xiuxia Song, Haijun Zhu, Shujuan Song, Wei Yuan, Qihan Wu*, Maohua Miao*. Gestational organophosphate esters (OPEs) exposure in association with placental DNA methylation levels of peroxisome proliferator-activated receptors (PPARs) signaling pathway-related genes. Science of the Total Environment. 2024, 15:947:174569.

3. Jiaxian Chen#,Haijun Zhu#,Yafei Chen, Shuqin Pan, Hong Liang, Xiuxia Song, Qihan Wu, Wei Yuan, Maohua Miao, Ziliang Wang*. The Role of Placental DNA Methylation at Reproduction-Related Genes in Associations between Prenatal Bisphenol Analogues Exposure and the Digit Ratio in Children at Age 4: A Birth Cohort Study. Environ Sci Technol. 2024. 2;58(26):11320-11330.

4. Zhang, S.#, Wu, Q.#, He, W., Zhu, H., Wang, Z., Liang, H., Ni, X., Yuan, W., & Lu, D.(2025). Bisphenol A alters JUN promoter methylation, impairing steroid metabolism in placental cells and linking to sub-representative phenotypes. Gene, 941, 149210.

七、联系人、联系电话、邮箱

吴老师，15618977533，henrywuqh@hotmail.com